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脂质体的制备方法——超声法

脂质体的制备方法——超声法

 

对于各种磷脂水分散体进行超声处理,是zui早采用的处理两亲性脂质的机械方法之一。由于局部受热和高能量的输入,样品不必加热到相变温度上。

超声技术有两种:一种是将超声仪的探头进入脂质体分散体中;另一种是将样品放在试管或烧杯内,再置于水浴式超声仪中。

探头式超声可能是小规模制备SUV应用zui广泛的方法。此法将jigao的能量输入脂质分散体中,可直接用于MLV。探头处能量的释放会导致局部过热,因此(盛有样品的)容器必须进入冰/水浴中。注意: 超声达到1h,会有5%以上的磷脂发生脱酯化(水解)。

 

超声法制备脂质体

设备与试剂

简易台式离心机

自制的专用耐热玻璃锥形离心管(也可用普通烧瓶,如25mL或50mL的圆底烧瓶)

超声波细胞破碎仪

  1. 棕榈酰-2-油酰-sn-甘油-3-磷脂酰胆碱  (DPPC)

    方法

  1. 1-10ml MLV 分散体(参照手摇法)置于锥形离心管中,之后放在0℃水浴中

  2. 将超声波细胞破碎仪的换能器探头浸入样品中,并准确调整其高度至稍高于容器底部1cm(0.4英寸)。

  3. 通入氮气(如果使用不饱和磷脂,此步骤尤为重要)。

  4. 接通超声波细胞破碎仪,调节超声功率至输出功率为100W左右。

  5. 将定时器设为10—60min,有效超声时间为50%—100%。分散体必须从乳白色转变为呈乳光状—对着日光能透过样品看清窗框。

  6. 用简易台式离心机12000r/min离心10—15min,除去较大的粒子(<3%)和从换能器探头上脱落的金属屑(钛)。

    注:超声法制得的小囊泡(d<40nm)通常处于亚稳态。融合成直径为60—80nm的囊泡后,可将脂质双分子层的高曲率能量释放出来。因此,建议将囊泡置于暗处,室温放置过夜。100000g离心1h除去经探头超声后仍存在的小部分MLV。许多可被包封的分子经过剧烈超声都会受到破坏

    摘自《药学专著译丛——脂质体(原著第2版)》

     

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